方法名稱： 利福平片－利福平－高效液相色譜法

應(yīng)用范圍： 本方法采用高效液相色譜法測(cè)定利福平片中利福平的含量。

本方法適用于利福平片。

方法原理： 供試品經(jīng)乙腈溶解并定量稀釋，進(jìn)入高效液相色譜儀進(jìn)行色譜分離，用紫外吸收檢測(cè)器，于波長(zhǎng)254nm處檢測(cè)利福平的峰面積，計(jì)算出其含量。

試劑：

1. 甲醇

2. 乙腈

3. 磷酸二氫鉀溶液(0.075mol/L)

4. 枸櫞酸溶液(1.0mol/L)

儀器設(shè)備：

1. 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

辛基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論塔板數(shù)按利福平峰計(jì)算應(yīng)不低于1500。

1.3 紫外吸收檢測(cè)器

2. 色譜條件

2.1 流動(dòng)相：甲醇 乙腈 0.075mol/L磷酸二氫鉀溶液 1.0mol/L枸櫞酸溶液=30 30 36 4

2.2 檢測(cè)波長(zhǎng)：254nm

2.3 柱溫：室溫

試樣制備：

1. 對(duì)照品溶液的制備

精密稱取利福平對(duì)照品適量，用乙腈溶解并定量稀釋成每1mL中約含0.08mg的溶液，即為對(duì)照品溶液。

2. 供試品溶液的制備

取供試品10片，精密稱定，研細(xì)，精密稱取適量（約相當(dāng)于利福平80mg），用乙腈溶解并定量稀釋成每1mL中約含0.8mg的溶液，用0.45µm濾膜濾過(guò)，精密量取續(xù)濾液適量，用乙腈定量稀釋成每1mL中約含0.08mg的溶液，即為供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所稱取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)該體積移液管的精度要求。

操作步驟： 分別精密吸取對(duì)照品溶液和供試品溶液各10mL，注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測(cè)器于波長(zhǎng)254nm處測(cè)定利福平（C43H58N4O12）的峰面積，計(jì)算出其含量。

參考文獻(xiàn)： 中華人民共和國(guó)藥典，國(guó)家藥典委員會(huì)編，化學(xué)工業(yè)出版社，2005版，二部，p.266。