方法名稱： 甲狀腺片—碘的測定—分光光度法

應(yīng)用范圍： 本方法采用分光光度法測定甲狀腺片中碘的含量。

本方法適用于甲狀腺片。

方法原理： 供試品照氧瓶燃燒法進行有機破壞，以氫氧化鈉溶液為吸收液，俟生成的煙霧完全吸收后，取上清液加1mol/L硫酸溶液調(diào)節(jié)pH值約為2，用磷酸鹽緩沖液（pH2.0）定量稀釋，

滴加溴試液至溶液呈穩(wěn)定的淡黃色，加熱至沸時取下，立即加入20%甲酸鈉溶液1~2滴，使殘留的溴色完全褪去，再加熱至沸時取下，放冷至室溫，加水、1%碘化鉀溶液與淀粉溶液，定量稀釋，搖勻，置冰浴中15分鐘后，迅速調(diào)至室溫，再放置5分鐘，，置紫外可見分光光度計，于585nm波長處測定吸收度，計算出其含量。

試劑： 1. 醋酸-溴溶液

2. 0.4%氫氧化鈉溶液

3. 甲酸

4. 碘化鉀

5. 1%碘化鉀溶液

6. 淀粉溶液

7.硫酸溶液(1mol/L)

8. 磷酸鹽緩沖液（pH2.0）

9. 溴試液

10. 20%甲酸鈉溶液

1.1 稀硫酸

儀器設(shè)備： 紫外可見分光光度計

試樣制備： 1. 醋酸-溴溶液

取醋酸鉀10g，加少量冰醋酸溶解后，加溴0.40mL，以冰醋酸稀釋至100mL。

2. 淀粉溶液

取可溶性淀粉0.3g與水揚酸0.1g，加水5mL，攪成糊狀，溶于60mL沸水中，煮沸1分鐘，放冷即得，可用3~4日。

3.硫酸溶液(1mol/L)

取硫酸30mL，緩緩注入適量水中，冷卻至室溫，加水稀釋至1000mL，搖勻。

4. 磷酸鹽緩沖液（pH2.0）

甲液：取磷酸16.6mL，加水至1000mL，搖勻；乙液：取磷酸氫二鈉71.63g，加水使溶解成1000mL。取上述甲液72.5mL與乙液27.5mL混合，搖勻，即得。

5. 溴試液

取溴2~3mL，置用凡士林涂塞的玻璃瓶中，加水100mL，振搖使成飽和的溶液，即得。本液應(yīng)置暗處保存。

6. 稀硫酸

取硫酸57mL，加水稀釋至1000mL。

7.對照品溶液的制備

精密稱取碘化鉀對照品0.2224g，置100mL量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取2mL，置200mL量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，精密量取5mL，置100mL量瓶中，加磷酸鹽緩沖液（pH2.0）稀釋至刻度，搖勻，即得對照品溶液（每1mL中含碘0.85µg）。

8. 供試品溶液的制備

取供試品20片，除去包衣后，精密稱定，研細，精密稱取適量（相當(dāng)于甲狀腺粉35mg），照氧瓶燃燒法進行有機破壞，選用1000mL燃燒瓶，精密加入0.4%氫氧化鈉溶液50mL為吸收液，俟生成的煙霧完全吸收后，搖勻，精密量取上清液10mL，加1mol/L硫酸溶液調(diào)節(jié)pH值約為2，用磷酸鹽緩沖液（pH2.0）定量稀釋成每1mL中含碘0.85µg的溶液，即得供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至稱取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國家標(biāo)準(zhǔn)中對該體積移液管的精度要求。

操作步驟： 精密量取供試品溶液10mL，置25mL燒杯中，滴加溴試液至溶液呈穩(wěn)定的淡黃色，加熱至沸時取下，立即加入20%甲酸鈉溶液1~2滴，使殘留的溴色完全褪去，再加熱至沸時取下，放冷至室溫，加水3mL、1%碘化鉀溶液1.0mL與淀粉溶液1.0mL，定量轉(zhuǎn)移25mL量瓶中，加水至刻度，搖勻，置冰浴中15分鐘后，迅速調(diào)至室溫，再放置5分鐘，另精密量取對照品溶液10mL，置25mL燒杯中，加稀硫酸1滴后，自“滴加溴試液至溶液呈穩(wěn)定的淡黃色”起同法操作，取對照品溶液與供試品溶液照紫外分光光度法，于波長585nm處測定吸收度。

注：分光光度法應(yīng)以配制供試品的同批溶劑為對照，采用1cm的石英吸收池。以吸收度最大的波長作為測定波長，一般供試品的吸收度讀數(shù)，以在0.3-0.7之間的誤差較小。儀器的狹縫波帶寬度應(yīng)小于供試品吸收帶的半寬度，否則測得的吸收度偏低。狹縫寬度的選擇，應(yīng)以減少狹縫寬度時供試品的吸收度不再增加為準(zhǔn)。由于吸收池和溶劑本身可能有空白吸收，因此測定供試品的吸收度后應(yīng)減去空白讀數(shù)，再計算含量。

參考文獻： 中華人民共和國藥典，國家藥典委員會編，化學(xué)工業(yè)出版社，2005年版，二部，p.113。