方法名稱: 注射用吲哚菁綠—吲哚菁綠的測(cè)定—分光光度法
應(yīng)用范圍: 本方法采用分光光度法測(cè)定注射用吲哚菁綠中吲哚菁綠的含量。
本方法適用于注射用吲哚菁綠。
方法原理: 供試品加甲醇溶解并定量稀釋制成供試液,置紫外可見(jiàn)分光光度計(jì),于784nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸收度,計(jì)算出其含量。
試劑: 甲醇
儀器設(shè)備: 紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)
試樣制備: 1. 供試品溶液的制備
取供試品5支,分別加甲醇適量使溶解后,分別置10mL量瓶中,用甲醇分次洗滌容器,洗液并入量瓶中,并稀釋至刻度,搖勻,精密量取適量,加甲醇制成每1mL中約含2.5µg的溶液,即得供試品溶液。
注:“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至稱取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)該體積移液管的精度要求。
操作步驟: 取供試品溶液照紫外-可見(jiàn)分光光度法,于波長(zhǎng)784nm處測(cè)定吸收度,按C43H43N2NaO6S2的吸收系數(shù)(E1m)為3120計(jì)算每支的含量,并求得5支的平均含量。
注:分光光度法應(yīng)以配制供試品的同批溶劑為對(duì)照,采用1cm的石英吸收池。以吸收度最大的波長(zhǎng)作為測(cè)定波長(zhǎng),一般供試品的吸收度讀數(shù),以在0.3-0.7之間的誤差較小。儀器的狹縫波帶寬度應(yīng)小于供試品吸收帶的半寬度,否則測(cè)得的吸收度偏低。狹縫寬度的選擇,應(yīng)以減少狹縫寬度時(shí)供試品的吸收度不再增加為準(zhǔn)。由于吸收池和溶劑本身可能有空白吸收,因此測(cè)定供試品的吸收度后應(yīng)減去空白讀數(shù),再計(jì)算含量。
參考文獻(xiàn): 中華人民共和國(guó)藥典,國(guó)家藥典委員會(huì)編,化學(xué)工業(yè)出版社,2005年版,二部,p.258。