方法名稱：

注射用氫化可的松琥珀酸鈉—氫化可的松琥珀酸鈉的測定—高效液相色譜法

應用范圍：

本方法采用高效液相色譜法測定注射用氫化可的松琥珀酸鈉中氫化可的松琥珀酸鈉（C25H33NaO8）的含量。

本方法適用于注射用氫化可的松琥珀酸鈉。

方法原理：

供試品經(jīng)稱取制成流動相溶液，進入高效液相色譜儀進行色譜分離，用紫外吸收檢測器，于波長242nm處檢測氫化可的松琥珀酸鈉吸收值，計算出其含量。

試劑：

1. 甲醇

2. 磷酸鹽緩沖液

儀器設備：

1. 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論板數(shù)按氫化可的松琥珀酸鈉峰計算應不低于3000。

1.3 紫外吸收檢測器

2. 色譜條件

2.1 流動相：甲醇 磷酸鹽緩沖液=43 57

2.2 檢測波長：242nm

2.3 柱溫：室溫

試樣制備：

1. 磷酸鹽緩沖液

8mmol/L磷酸二氫鉀溶液，用8mmol/L磷酸氫二鉀溶液調(diào)pH值5.0±0.1，臨用前新配。

2. 稱取供試品

取本品裝量差異項下混合均勻的內(nèi)容物適量，精密稱定。

3. 對照品溶液的制備

精密稱取氫化可的松琥珀酸鈉對照品適量，加流動相溶解并定量稀釋成每1mL含40μg的溶液。

精密稱取氫化可的松對照品適量，加流動相溶解并定量稀釋成每1mL含10μg的溶液。

4. 供試品溶液的制備

將上述供試品加流動相溶解并定量稀釋制成每1mL含40μg的溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應準確至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準確度應符合國家標準中對該體積移液管的精度要求。

操作步驟：

分別精密吸取上述對照品溶液與供試品溶液各20μL 注入高效液相色譜儀，記錄色譜圖，出峰順序依次為17-氫化可的松琥珀酸鈉、21-氫化可的松琥珀酸鈉和游離氫化可的松，用紫外吸收檢測器，按外標法以峰面積計算，17-氫化可的松琥珀酸鈉峰和21-氫化可的松琥珀酸鈉峰面積總和，作為氫化可的松琥珀酸峰面積計算，并乘以0.748，折合為氫化可的松的量與游離氫化可的松的量合并計算。

參考文獻：

中華人民共和國藥典，國家藥典委員會編，化學工業(yè)出版社，2005年版，二部，p.404。