方法名稱： 含糖胃蛋白酶—胃蛋白酶的測定—胃蛋白酶測定法

應(yīng)用范圍： 本方法采用胃蛋白酶測定法測定含糖胃蛋白酶中胃蛋白酶的效價。

本方法適用于含糖胃蛋白酶。

方法原理： 精密稱取本品適量，加鹽酸溶液制成每1mL中約含0.2-0.4個單位的溶液，照胃蛋白酶測定法，測定胃蛋白酶的效價。

試劑： 1. 血紅蛋白試液

2. 三氟醋酸溶液

3. 鹽酸溶液

儀器設(shè)備： 可見分光光度計

試樣制備： 1. 供試品溶液的制備

精密稱取適量，加鹽酸溶液稀釋制成每1mL中約含0.2-0.4個單位的溶液，作為供試品溶液。

2. 對照品溶液的制備

精密稱取酪氨酸對照品適量，加鹽酸溶液稀釋制成每1mL中約含0.5mg的溶液，作為對照品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所稱取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國家標(biāo)準(zhǔn)中對該體積移液管的精度要求。

操作步驟： 1.供試品的測定

取大小相同的試管6支，其中3支精密加入對照品溶液1mL，另3支精密加入供試品溶液1mL，置37℃±0.5℃水浴中，保溫5分鐘，精密加入預(yù)熱至37℃±0.5℃的血紅蛋白試液5mL，搖勻，并準(zhǔn)確計時，在37℃±0.5℃水浴中反應(yīng)10分鐘，立即精密加入5%三氟醋酸溶液5mL，搖勻，濾過，取續(xù)濾液備用。另取試管2支，各精密加入血紅蛋白試液5mL，置37℃±0.5℃水浴中保溫10分鐘，再精密加入5%三氟醋酸溶液5mL，其中一支加供試品溶液1mL，另一支加上述鹽酸溶液1mL，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，分別作為供試品和對照品的空白對照，照紫外-可見分光光度法，在275nm的波長處測定吸光度，按下列公式計算，即得。

參考文獻(xiàn)： 中華人民共和國藥典，國家藥典委員會編，化學(xué)工業(yè)出版社，2005年版，二部，p.390。