方法名稱：

硝酸異山梨酯片—硝酸異山梨酯的測(cè)定—高效液相色譜法

應(yīng)用范圍：

本方法采用高效液相色譜法測(cè)定硝酸異山梨酯片中硝酸異山梨酯（C6H8N2O8）的含量。

本方法適用于硝酸異山梨酯片中硝酸異山梨酯的含量測(cè)定。

方法原理：

取本品適量，精密稱定，研細(xì)，精密稱取適量，加流動(dòng)相振搖，溶解后加內(nèi)標(biāo)，稀釋至刻度，加流動(dòng)相稀釋，精密量取該溶液注入液相色譜儀，在230nm波長(zhǎng)處檢測(cè)，記錄色譜圖。按內(nèi)標(biāo)法以峰面積計(jì)算，即得。

試劑：

1.甲醇

2.氫化潑尼松

儀器設(shè)備：

1.儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論板數(shù)按硝酸異山梨酯峰計(jì)算應(yīng)不低于5000。

1.3 紫外吸收檢測(cè)器

2.色譜條件

2.1 流動(dòng)相：甲醇+水= 54 46

2.2 檢測(cè)波長(zhǎng)：230nm

2.3 柱溫：室溫

試樣制備：

1.對(duì)照品溶液的制備

精密稱取硝酸異山梨酯對(duì)照品25mg，置50mL量瓶中，加甲醇27mL溶解后，用水稀釋，放冷至室溫，再用水稀釋至刻度，搖勻，為對(duì)照品溶液。

2.內(nèi)標(biāo)溶液的配制

精密稱取氫化潑尼松適量，加流動(dòng)相溶解并稀釋制成每1mL中約含80μg的溶液，記得。

3.供試品溶液的制備

取本品10片，精密稱定，研細(xì)，精密稱取適量（約相當(dāng)于硝酸異山梨酯5mg），置50mL量瓶中，加流動(dòng)相振搖15min，使硝酸異山梨酯溶解，精密加內(nèi)標(biāo)溶液10mL，流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)，續(xù)濾液為供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)該體積移液管的精度要求。

操作步驟：

精密量取供試品溶液20μL注入高效液相色譜儀，于230nm波長(zhǎng)處測(cè)定硝酸異山梨酯的吸收值，另精密量取對(duì)照品溶液5mL同上處理，測(cè)定。計(jì)算出其含量。