人參皂甙Re 對(duì)照品溶液的制備 精密稱取人參皂甙Re對(duì)照品8mg,置5ml量瓶中,加甲醇溶解并稀釋至刻度,搖勻,即得(每1ml中含人參皂甙Re 1.6mg)。標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備 精密量取對(duì)照品溶液0、20、40、60、80、100μl,分別置10ml具塞試管中,置水浴上揮去溶劑,立即取出,放冷,加5%香草醛冰醋酸溶液0.2ml、高氯酸0.8ml,搖勻,置60℃水浴中加熱15分鐘,取出,用水冷卻2分鐘,加冰醋酸5ml,搖勻,照分光光度法(附錄Ⅴ B),在544nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸收度,以吸收度為縱坐標(biāo)、濃度為橫坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。供試品溶液的制備 精密量取該品20ml,置分液漏斗中,用氯仿提取3次,每次20ml,合并氯仿提取液,用蒸餾水洗滌2次,每次5ml,棄去氯仿液,洗液與上述水層合并,置分液漏斗中,用水飽和的正丁醇提取3次,每次50ml,合并正丁醇提取液,加入無(wú)水硫酸鈉3g,攪拌,放至澄清。將正丁醇液移至蒸發(fā)皿中,用少量正丁醇洗滌無(wú)水硫酸鈉,洗液并入蒸發(fā)皿中,蒸干,用少量蒸餾水溶解殘?jiān)?,加到大孔吸附?shù)脂(DA-201)柱上,侍液面接近棉花層后,用蒸餾水100ml洗脫(控制流速為0.4ml/min),棄去洗液,用70%乙醇80ml 洗脫,收集洗脫液于蒸發(fā)皿中,置水浴上蒸干,用甲醇溶解殘?jiān)?,移?ml量瓶中,加甲醇至刻度,搖勻,即得。
測(cè)定法 精密量取供試品溶液100μl,照標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備項(xiàng)下的方法,自“置10ml具塞試管中”起依法測(cè)定吸收度。從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出供試品溶液中人參皂甙Re的重量(μg),計(jì)算,即得。該品每支含人參以人參皂甙Re(C48H82O18)計(jì),不得少于2.0mg。斑蝥素 照氣相色譜法(附錄Ⅵ E)測(cè)定。色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn) 以聚乙二醇20M及甲基硅橡膠(SE-30)為固定液,涂布濃度分別為10%和5%,1:1混合裝柱。柱溫為180±10℃;理論板數(shù)按斑蝥素峰計(jì)算,應(yīng)不低于1500。
對(duì)照品溶液的制備 取斑蝥素對(duì)照品適量,精密稱定,加氯仿制成每1ml合0.1mg的溶液,作為對(duì)照品溶液。供試品溶液的制備 精密量取該品50ml,加入1.8mol/L硫酸溶液5ml,用氯仿振搖提取3次(50、30、30ml),合并氯仿液,用K-D濃縮器濃縮定容至5ml,即得。
測(cè)定法 分別精密量取對(duì)照品溶液和供試品溶液各5μl,注入氣相色譜儀,計(jì)算,即得。
該品每支含斑蝥素(C10H12O4)為0.008~0.030mg。