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基因工程菌株的培養(yǎng)與觀察

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  大腸桿菌是含有長約3000Kb的環(huán)狀染色體的棒狀細(xì)菌,它能在僅含碳水化合物(如葡萄糖,提供碳源和能量)和提供氮、磷、微量元素的無機(jī)鹽的極限培養(yǎng)基上快速生長。如果用含氨基酸、核苷酸前體、維生素以及其它一些細(xì)菌不能合成的代謝成分的豐富培養(yǎng)基來培養(yǎng),那么大腸桿菌會(huì)生長的更快。大多數(shù)應(yīng)用于DNA重組技術(shù)的細(xì)菌是大腸桿菌K-12株的衍生菌株。

  當(dāng)大腸桿菌在液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)時(shí),其開始裂殖前,先進(jìn)入一個(gè)生長滯后期。在豐富培養(yǎng)基中,它能在20-30min內(nèi)復(fù)制一代,這種指數(shù)生長相稱之為對(duì)數(shù)期。最后,當(dāng)培養(yǎng)基中的營養(yǎng)成分和氧耗盡或當(dāng)培養(yǎng)基中廢物的含量達(dá)到抑制細(xì)菌的快速生長的濃度時(shí),菌體密度就達(dá)到一個(gè)比較恒定的值。在通常的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)中,在這一時(shí)期的細(xì)胞密度一般為1*109~2*109ml,細(xì)胞停止迅速分裂。這就是細(xì)菌生長的飽和期,而所謂的新鮮飽和即指當(dāng)培養(yǎng)液中細(xì)胞密度剛到達(dá)這一水平。

  培養(yǎng)特征是指微生物在培養(yǎng)基上所表現(xiàn)的群體形態(tài)和生長情況。細(xì)菌培養(yǎng)特征的常規(guī)檢驗(yàn)包括平面上的菌落特征,液體培養(yǎng)時(shí)的生長特征以及斜面培養(yǎng)上的菌苔特征。菌落是個(gè)體微生物在固體培養(yǎng)基上生長繁殖成的肉眼可見的群落。在一定的培養(yǎng)條件下,不同的細(xì)菌形成的菌落形狀是不一樣的醫(yī)學(xué)`教育網(wǎng)搜集整理。

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