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重組蛋白的高效表達:
重組蛋白在大腸桿菌(E. coli)高效表達時,往往以不溶的、無活性的蛋白聚集體,即包涵體(inclusion body)的形式存在于細胞內(nèi)。必須從細胞內(nèi)分離出包涵體,采用高濃度變性劑(如7.0mol/L鹽酸胍、8.0mol/L脲)溶解包涵體,醫(yī)|學教育網(wǎng)搜集整理然后除去變性劑或降低變性劑的濃度,使包涵體蛋白得以復性,最后再用色譜法使目標蛋白質(zhì)得到純化。其中包涵體蛋白的復性和純化是整個過程中的核心。