免疫診斷試劑使用注意事項

一．試劑準備

1）試驗前將所需試劑盒組分在室溫或37℃平衡30分鐘；

2）試劑盒及其組分的保存按試劑盒操作說明書進行；

3）保存試劑盒的冰箱應(yīng)經(jīng)常檢查儲存溫度并作好記錄；

4）保存試劑盒的冰箱應(yīng)避免頻繁開關(guān)。

二．標本準備

1）抽血時，應(yīng)盡量避免溶血；

2）非抗凝血自然凝固1-2小時后，3000rpm離心15分鐘以制備血清標本；

3）用含有抗凝劑的采血管采血后，應(yīng)立即顛倒混合5-10次并放置一段時間后，3000rpm離心15分鐘以制備血漿標本；

4）標本若在五天內(nèi)檢測，應(yīng)在2-8℃冰箱中保存，標本若需長期貯存，應(yīng)于-20℃中密封保存，長期貯存的標本應(yīng)為血清或血漿；

5）用于ELISA一步法檢測的標本，不能使用NAN3防腐；

6）標本如需稀釋，請用人血清或小牛血清稀釋（說明書有指明的除外）。

三．加樣

1）加樣應(yīng)嚴格按照試劑盒說明書中所規(guī)定的量和順序進行；

2）加樣時應(yīng)將標本加在微孔反應(yīng)板底部；

3）如不慎將樣本或試劑濺出孔外時，應(yīng)用吸水紙輕拭吸干，并做好記錄；

4）手工操作時，微孔反應(yīng)板加樣后應(yīng)及時溫育；

5）標本加樣過多時應(yīng)分批操作，以免加樣后溫育前等待時間過長。

四．溫育

1）測量溫度應(yīng)使用校準過的水銀溫度計；

2）溫育容器的溫度應(yīng)恒定為37℃；

3）如果使用恒溫箱溫育時，除保證恒溫箱內(nèi)溫度為37℃外，還應(yīng)注意盡量少開啟恒溫箱門；溫育時微孔板不要疊加；

4）微孔板不要置室溫溫育；

5）嚴格按試劑盒操作說明書控制溫育時間，不能人為延長或縮短溫育時間；

6）微孔反應(yīng)板溫育時要加貼封片，這樣可以防止孔內(nèi)液體成分蒸發(fā)或水珠等雜質(zhì)滴入孔內(nèi)影響檢測結(jié)果；封片不能重復(fù)使用。

五．洗板

1）配置洗滌液需要新鮮、干凈，且無細菌污染的蒸餾水或去離子水，洗滌液應(yīng)現(xiàn)用現(xiàn)配；

2）盛放洗滌液的塑料容器應(yīng)經(jīng)常使用清洗劑徹底清洗，清洗干凈后的容器方可使用；

3）洗板時應(yīng)保證洗滌液注滿微孔反應(yīng)板的每個孔，洗完板后將微孔反應(yīng)板在吸水板上輕輕拍干；

4）為保證洗板前洗板針的暢通，應(yīng)經(jīng)常用細針清除掉洗板針內(nèi)積存的纖維蛋白等雜質(zhì)；

5）使用洗板機洗板時，合理安排洗板時間和洗板間隔，避免因反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長；

6）微孔反應(yīng)板洗板次數(shù)要保持一致，不能過多或過少；

7）如果微孔反應(yīng)板需要拼接于板架上，必須確保板條放平，以免影響洗板機操作而造成洗板不徹底。

六．顯色

1）OPD顯色劑要在使用前配制，不能使用過期顯色劑；請勿使用肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑；

2）添加顯色劑時，注意不能濺出孔外；

3）顯色劑應(yīng)避免接觸金屬器械。

七．終止

加終止液應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡，以免比色時結(jié)果不準確。

八．結(jié)果判讀

1）酶標儀讀數(shù)時，應(yīng)保證微孔反應(yīng)板底部清潔；

2）按說明書的規(guī)定進行讀數(shù)和結(jié)果判讀。

九。全過程

ELISA實驗的整個操作過程中保證微孔反應(yīng)板不接觸次氯酸。