對照品溶液的制備：精密稱取己烯雌酚對照品適量，加乙醇溶解并定量稀釋制成每1ml 中含20μg 的溶液，與同體積的2 ％磷酸氫二鉀溶液混合，即得。 供試品溶液的制備 精密量取供試品適量（約相當(dāng)于己烯雌酚1 ～10mg），置分液漏斗中，加石油醚（沸點(diǎn)60～90℃）75ml,用氫氧化鈉試液提取3次 (25ml、15ml、10ml),合并提取液，用氯仿振搖洗滌2 次，每次10ml，棄去氯仿層，在水層內(nèi)注意加入稀磷酸溶液(1→6)，調(diào)節(jié)pH值至9.5，再用氯仿提取4 次，每次20ml，合并氯仿提取液，經(jīng)鋪有無水硫酸鈉的漏斗濾入100ml 量瓶中，濾器用氯仿洗滌，洗液與濾液合并，并用氯仿稀釋至刻度，搖勻；精密量取適量（約相當(dāng)于己烯雌酚0.2mg ），置水浴上蒸干，冷卻，精密加入乙醇10ml使溶解，與同體積的2 ％磷酸氫二鉀溶液混合，即得醫(yī)|學(xué)教育網(wǎng)搜集整理。

紫外光照射條件的選定：取對照品溶液，置1cm 石英池中，于20Ｗ紫外光燈管（橫置，支架高約8～10cm，兩側(cè)應(yīng)加遮蔽）的正下方，自上而下照射10分鐘，在418nm的波長處測定吸收度（以未經(jīng)照射的對照品溶液為空白），然后按同一方法再照射數(shù)次并測定吸收度，每次照射1 分鐘，直至吸收度不再增加為止，以總的照射時(shí)間作為選定的條件，即得。如照射時(shí)間增至20分鐘以上尚未達(dá)到最大吸收值，則應(yīng)增加紫外光的強(qiáng)度；如照射時(shí)間在10分鐘內(nèi)即已達(dá)到最大值，則可加大燈管與溶液之間的距離。

測定法：取同體積的對照品溶液與供試品溶液，分別置1cm 石英池中，按紫外光照射條件的選定項(xiàng)下的方法，在選定的照射時(shí)間內(nèi)照射后，照分光光度法分別用未經(jīng)照射的相應(yīng)溶液作空白，在418nm 的波長處測定各自的吸收度，計(jì)算，即得。